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据推测，很多人都听说过试管婴儿胚胎冷冻技术，这是人类辅助生殖治疗中非常重要的技术。一些想做试管婴儿的不孕症患者会更好奇，试管婴儿如何保存胚胎。 Jetering Hospital介绍了冷胚冷冻保存技术的一些主要方法。
程序冻结方法
程序冷冻方法主要使用低浓度冷冻保存梯度脱水，并通过程序低温恒温器缓慢冷却。主要步骤包括：将细胞逐步加入一系列溶液中，增加浓度的防腐剂，将其逐渐脱水，放入冰箱冷却至-6°C（诱导冰晶形成），然后缓慢冷却程序到温度。在-30℃〜-80℃之后储存液氮。在此过程中，胚胎逐渐脱水，希望解决试管婴儿胚胎冷冻引起的细胞损伤机制中的三个问题。但是，程序冻结存在一些问题。首先，在冷冻和复苏期间形成冰晶会增加受伤的机会。溶液效应（冷冻期间高细胞外渗透压）和渗透压休克（复苏期间细胞外渗透压低）仍未完全解决;这需要时间（3小时），需要昂贵的程序冷冻机。
玻璃化冷冻法
缓慢冷冻或玻璃化来自自然启蒙。科学家已经发现某些类型的青蛙可以在冬天被冻结几十度，但在春天解冻没有任何损害。研究已经认识到，当存在甘油时，青蛙在体内被冻结，而不是水作为细胞内溶剂，并且在春天醒来后甘油消失。术语“玻璃化”是指当水或溶液快速冷却至-100℃至-110℃的温度时，在液体和固体之间形成高粘度无定形透明玻璃。玻璃化技术的基本原理是用高浓度的冷冻保护剂溶液代替细胞内水，并且通过快速冷却将液晶转变成非晶态，其形状像玻璃。 1985年，玻璃化冷冻小鼠胚胎首次成功。目前，玻璃化冷冻保存细胞已成功应用于动物卵母细胞，血细胞和胚胎，角膜，皮肤，血管等组织，并于1990年开始应用于人类胚胎，并取得了广泛的成功。
玻璃冷冻技术是快速冷冻和高浓度冷冻保护剂的结合。快速冷却，低温下形成透明玻璃状固体，冷却时粘度高，但不形成冰晶，避免冰晶形成对细胞脂质膜和细胞骨架结构的破坏，保持液体的正常分子和离子分布细胞内外。玻璃化和冷冻的主要操作步骤很简单，包括：高浓度的冷冻保护剂，以取代电池内外的溶液，快速冷却，使溶液的粘度极度增加和固化，并储存液氮。
影响玻璃化效果的因素主要包括：
（1）冷冻保护剂。相同的组织细胞，冷冻保护剂的浓度和类型是最重要的因素。细胞外冷冻保护剂通常使用大分子物质，如多糖（蔗糖，海藻糖），聚乙二醇，胎牛血清白卵白（BSA）和Percoll等;细胞内冷冻保护剂具有很好的穿透性，可用于二甲基亚砜，乙二醇和丙二醇等小分子物质。冷冻保护剂的毒性也是玻璃化的主要问题，但许多临床和动物实验迄今未发现对动物和人类胚胎的任何不利影响;
（2）温度下降的速度。冷却速度越快越好，直接注入液氮的方法，冷却速度约为2500℃/min，玻璃化冷冻机的冷却速度可达135000℃/min;
（3）胚胎载体。对试管婴儿胚胎载体的要求是胚胎周围的冷冻保存体积应尽可能小，液氮之间的空间尽可能小，易于操作且不易丢失胚胎。目前常用的有：稀释秸秆，Cryotop，Cryotip，Cryoleaf，Direct microdrop方法，电子显微镜网络和Cryoloop。
目前，有大量文献表明，体外婴儿玻璃化冷冻胚胎冷冻技术可以显着提高胚胎的恢复率和移植后患者的临床妊娠率，这是一种很有前景的方法。
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